C18 sütunu nasıl yeniden başlatılır

HPLC ters faz C18 kolonunuzu yeniden oluşturun.

1. Adım

Akış akışından C18 kolonunu ayırın ve sütunu ters yönde değiştirin. Çözücüyü kolondan ters yönde geri döndürmek, zaman içinde oluşan paketleme etkisini gevşetecektir. Kolonun sonunda büyük miktarda ambalaj malzemesi kaybetmemeye dikkat edilmelidir. Bazı üreticiler, kolonun akış yukarı ucunda daha büyük bir ağ kullanırlar, böylece akış yönü tersine çevrildiğinde daha büyük ağ aşağı yönde pozisyondadır. Bu rejenerasyon yöntemine geri yıkama denir. Sistemin dedektörüne akan ve muhtemelen bir fişe neden olan ambalaj malzemesine karşı korumak için, sistemin dedektör bağlı olmadan çalışmasını ve kolonun çıkış akışını atığa yönlendirmesini sağlar.

2. Adım

Solvent giriş tüpünü, kolon ile tutulan bileşikleri ters yönde ayırmak için bir dizi solvente yerleştirin. Kullanılan solvent serisi hidrofilik özelliklerine göre değişir. Çözücüleri değiştirerek, eşit olarak çeşitli hidrofilik yapıdaki bileşikleri ayrıştırırsınız. Aşağıdaki çözücülerin her birinin 50 ml'sini sırasıyla: su (çözücünüzde bir tampon kullanıyorsanız), metanol, izopropanol, diklorometan, heksan, diklorometan ve izopropanol kullanın.

3. adım

Sütunu doğru yönde yeniden bağlayın ve çözücü sistem üzerinden çalıştırın. Devam etmeden önce sütunu yıkamak için en az 75 ml çözücü kullanın. Sütun yeni olduğunda yaptığınız bir standardın bir enjeksiyon testi yapın ve sonuçları kontrol edin. Maksimum saklama süresi, en yüksek sıralar ve toplam analiz süresine özellikle dikkat edin. Bu özniteliklerin, yeni olduğunda sütunun ilk yürütülmesiyle çakışması derecesi, sütunun yeniden oluşturulduğu dereceyi gösterecektir. Sonuçlar tatmin edici değilse, sütunu yenisiyle değiştirin ve eski sütunu çöp kutusuna atın.